Биологические свойства хламидий. Хламидии. Хламидиоз. Жизненный цикл хламидии. Классификация хламидий Хламидии таксономия

1) элементарные тельца – мелкие (0,2 – 0,5 мкм) электронно-плотные шаровидные структуры, имеющие компактный нуклеоид и ригидную трехслойную клеточную стенку;

2) инициальные (исходные), или ретикулярные, тельца – большие (0,8 – 1,5 мкм в диаметре) сферические образования, имеющие сетчатую структуру с тонкой клеточной стенкой и фибриллярным нуклеоидом;

3) промежуточные тельца – промежуточная стадия между элементарными и ретикулярными тельцами.

Элементарные тельца являются инфекционной, а ретикулярные – вегетативной формой хламидий. Вегетативные формы размножаются путем бинарного деления внутриклеточно, но не инфекционны, когда выделяются из клетки-хозяина. Жизненный цикл хламидий начинается с того, что элементарные тельца фагоцитируются клеткой-хозяином, а затем в течение нескольких часов реорганизуются, увеличиваются в размерах и превращаются в ретикулярные формы, которые размножаются путем поперечного деления. Образующиеся дочерние формы также размножаются путем бинарного деления. Жизненный цикл заканчивается, когда возникающие промежуточные формы реорганизуются (уплотняются), уменьшаются в размерах и превращаются в элементарные тельца. Размножаясь внутри цитоплазматических везикул, хламидии образуют микроколонии, окруженные мембраной, возникающей из впячивания мембраны клетки при фагоцитозе элементарного тельца. В составе микроколоний обнаруживаются все 3 стадии развития хламидий. В одной клетке может быть несколько микроколоний, образующихся в случае фагоцитоза нескольких элементарных телец. После разрыва стенки везикулы и мембраны клетки-хозяина вновь образовавшиеся хламидии высвобождаются, и элементарные тельца, инфицируя другие клетки, повторяют цикл развития. Для микроскопического обнаружения хламидий в инфицированных клетках (тканях) применяют различные способы окрашивания: Романовского – Гимзы, Кастенады, Маккиавелло и др. При окрашивании по Романовскому – Гимзе они приобретают голубой или фиолетовый цвет. Однако хламидии хорошо видны и в неокрашенном состоянии при микроскопии влажных препаратов под стеклом с помощью фазовоконтрастной оптической системы. В оптимальных условиях роста в эукариотных клетках жизненный цикл хламидий составляет 17 – 40 ч. Хламидии хорошо размножаются в желточном мешке куриных эмбрионов при температуре от 33 до 41 °C (в зависимости от вида), а также в культурах клеток различных позвоночных. Содержание Г+Ц в ДНК хламидий варьирует от 39 до 45 мол %, отношение РНК/ДНК в элементарных тельцах в 2 раза меньше, чем в ретикулярных. У C. trachomatis обнаружено два важных метаболических признака: способность синтезировать гликоген и предшественники фолиевой кислоты, по которым (с учетом других признаков) они легко дифференцируются от других видов – C. psittaci и C. pneumoniae (табл. 51).

Таблица 51

Дифференциальные признаки трех видов Chlamydia

К роду Chlamydia, семейству Chlamydiaceae, порядку Chlamydiales принадлежат возбудители трахомы, конъюнктивитов (бленнореи с включениями), пахового лимфогранулематоза (бо­лезнь Никола - Фавра), орнитоза; они содержат ДНК и РНК, нуклеопротеиды, липиды, углеводы.

В цикле развития хламидий наблюдаются три стадии: 1) мелкие (0,2-0,4 мкм) элементарные тела, окруженные трех­слойной стенкой, которые содержат в компактном состоянии генетический материал нуклеоида и рибосомы; 2) первичные тела, крупные (0,8-1,5 мкм), имеют фибриллы нуклеоида и рибосомальные элементы, покрыты тонкой стенкой, размножа­ются путем деления; дочерние клетки реорганизуются в эле­ментарные тела, которые могут находиться внеклеточно и проникать в другие клетки; 3) промежуточная (транзиторная) стадия между первичными и элементарными телами. Мелкие

(элементарные) тела обладают инфекционными свойствами, крупные (первичные) тела выполняют вегетативную функцию, рост, размножение и созревание хламидий завершаются в течение 40 ч.

К возбудителю трахомы чувствительны обезьяны, у которых при заражении в конъюнктиву развивается экспериментальная трахома, сходная с заболеванием у человека; некоторые штам­мы могут размножаться в легких мышей и морских свинок, зараженных интраназально, а также при подкожном заражении морских свинок и интрацеребрально у мышей. Резервуар возбудителя - человек. Заболевание у людей сопровождается блефарокератоконъюнктивитом. У больных развиваются хро­ническое воспаление соединительной оболочки глаз, гиперпла­зия ткани и гипертрофия фолликулов, имеющих вид прозрач­ных зерен. В тяжелых случаях в связи с гипертрофией фолликулов конъюнктива имеет вид лягушечьей икры. В дальнейшем наступает рубцевание фолликулов.

Трахома передается при контакте с больными через полотен­це, грязные руки, при умывании в общем тазу, а также мухами.

Лабораторная диагностика осуществляется путем обнаруже­ния включений в клетках эпителия конъюнктивы.

Лечение успешно проводится антибиотиками (тетрациклины, эритромицин) и сульфаниламидными препаратами.

Профилактика включает своевременное выявление и полно­ценное лечение больных, диспансерное обслуживание очагов, оздоровление условий труда и быта, повышение материального и культурного уровня населения. Очень высокая заболеваемость трахомой отмечается в Индии и других странах Азии, в Африке. Трахомой болеют 400-500 млн. людей, проживающих в развивающихся странах; она является основной причиной слепоты.

Конъюнктивит новорожденных, или бленнорея с включениями, вызывается Chl.trachomatis (рис. 116,9), болезнь проте­кает с явлениями инфильтрации конъюнктивы, особенно ниж­него века. Продолжительность острой фазы 10-15 дней, но заметная инфильтрация сохраняется в течение 2-3 мес и дольше. Источником заражения являются матери, у которых возбудитель сохраняется в мочеполовой системе и передается во время родов новорожденным детям. Взрослые заражаются при купании в небольших прудах и нехлорированных бассейнах. Заболевание у них проявляется в виде острого фолликулярного конъюнктивита и продолжается около года. Лечение проводится сульфаниламидными препаратами и антибиотиками. Введение нитрата серебра для профилактики гонорейной бленнореи не предупреждает конъюнктивита с включениями.

Возбудитель венерического лимфогранулематоза - Chl.trachomatis. Болезнь передается половым путем, встречается в жарких субтропических странах. В СССР случаев заболевания нет. Этот микроорганизм может также вызывать уретриты, проктиты, артриты.

Лабораторная диагностика проводится при помощи микро­скопии с обработкой мазков по Романовскому - Гимзе. Диагно­стическое значение имеют реакция связывания комплемента и аллергическая проба. Используют внутримозговое заражение белых мышей, у которых развивается менингит со смертель­ным исходом.

Лечение. Применяют тетрациклины, пенициллин и сульфа-ниламидные препараты.

Возбудитель орнитоза - Chl.psittaci-вызывает забо­левания у многих видов птиц. Возбудитель открыт в 1933 г. К. Манером.

Морфология и способ размножения такие же, как и у всего рода СЫатуша. В мазках-отпечатках или срезах из органов микроорганизмы располагаются в виде скоплений, окруженных везикулярной мембраной. Их можно обнаружить при окраске по Романовскому-Гимзе, в клетках лимфоидно-макрофагальной системы или внеклеточно при их разрыве (см. рис. 116,4). Содержание Г+Ц в ДНК нуклеоида 39-45%. Хламидии развиваются в желточном мешке куриных эмбрионов или организме белых мышей, а также в культуре тканей и в клетках опухолей при 39°С.

Хламидии имеют два антигена: термостабильный, являющий­ся общим для группы орнитоза-пситтакоза- лимфогранулематоза, и термолабильный, разрушающийся при 60°С и содержащий белковую субстанцию.

Резистентность очень высокая. Хламидии сохраняются живы­ми в течение 2 лет при температуре - 70° С. Инфицированные ткани при 4° С продолжают быть заразными на протяжении нескольких недель. Нагревание при температуре 60-70° С убивает хламидии в течение 10-15 мин. Чувствительны к действию обычных дезинфицирующих растворов (хлорамина).

К возбудителю орнитоза весьма восприимчивы более 100 видов диких и домашних птиц (попугаи, голуби, цыплята и др.), а также белые мыши, крысы, морские свинки, кролики, обезьяны. Различные штаммы Chl.psittaci вызывают пситтакоз, орнитоз, пневмонию у телят, овец, коз, свиней, лошадей; полиартриты у овец, телят, свиней; плацентиты и аборты у телят и овец; энтериты у телят; конъюнктивиты у морских свинок, телят и овец; энцефалиты у сумчатых крыс и энцефаломиелиты у телят. У попугаев болезнь характеризуется насморком, энтеритом, изнурительным поносом и обычно за­канчивается летально. Заболевания наблюдаются в Южной Америке, Австралии и других странах.

Возбудитель, проникший в организм человека, поступает в ркровь и вызывает бактериемию, которая продолжается в | течение недели, а иногда и дольше. В тканях и органах I,возбудитель проделывает сложные циклы, которые обусловливают нарушение клеточного метаболизма, развитие интоксикации и аллергии. Для орнитоза характерно возникновение пневмонического очага без одышки, кашля и болевых ощуще­ний в грудной клетке. В разгар заболевания при рентгенологическом исследовании выявляется картина краевой лобулярной бронхопневмонии; рассасывание экссудата происходит медлен­но.

Источники инфекции-птицы (больные или носители), до­машние и дикие голуби, утки, куры, индейки. Взрослые птицы выздоравливают, молодняк в большом проценте случаев поги­бает. Возбудитель выделяется с экскрементами, от которых заражаются здоровые птицы и люди. Заражение животных возможно внутриутробно, при половом контакте и укусе кровососущими насекомыми.

Человек заражается обычно аэрогенным путем при вдыхании инфицированной пыли или пуха, а также при разделке птиц, чистке клеток и уходе за птицей, что сопровождается загрязне­нием рук и попаданием возбудителя на слизистые оболочки. Не исключена возможность заражения от больных людей воздуш­но-капельным путем.

Иммунитет после перенесения болезни относителен и непро­должителен. Отмечены повторные заболевания, особенно среди лабораторных работников. Механизм защиты организма связан с наличием антител.

Лабораторная диагностика. Возбудитель обнаруживают в первые дни болезни в мокроте и крови. В крови он сохраняется до 5-7-го дня, в мокроте-до 21-го дня болезни; отмечена максимальная длительность выделения хламидии с мокротой в продолжение 8 лет. При исследовании материала вскрытия микроорганизм был выделен из ткани легкого, селезенки, экссудата. Для распознавания орнитоза применяют микроско­пию, реакцию связывания комплемента с парными сыворотками (в начале и в конце заболевания).

Хламидии можно выделить из крови и мокроты больных людей внутримозговым заражени­ем белых мышей. Возбудитель можно обнаружить в мазках из селезенки, печени и в срезах мозга подопытных животных, зараженных внутрибрюшинным способом. Выделение возбуди­теля возможно и при заражении куриных эмбрионов в желточ­ный мешок. Хороший результат дает аллергическая проба с орнитином и метод флюоресценции.

Лечение. Назначаются тетрациклины, стрептомицин; при хро­нических формах рекомендуют вакцинотерапию.

Профилактика. Достигается последовательными мероприяти­ями: ранней диагностикой, изоляцией и госпитализацией боль­ных в инфекционные больницы (в отдельные палаты или боксы). Обслуживающий персонал должен носить маски, руки регулярно дезинфицировать 0,5% раствором хлорамина.

Хламидии (Chlamydia) -- мелкие грамотрицательные кокковидные бактерии, размером 250-1500нм (0,25-1 мкм). Они имеют все основные признаки бактерий: содержат два типа нуклеиновых кислот (ДНК и РНК), рибосомы, мурамовую кислоту (компонент клеточной стенки грамотрицательных бактерий), размножаются бинарным делением и чувствительны к некоторым антибиотикам.

В 1966 году на 9-м Международном съезде микробиологов хламидии были исключены из класса вирусов.

Таксономия

Все хламидии сгруппированы в порядок Chlamydiaceae , род Chlamydia , последний включает четыре вида:

1. Chlamydia trachomatis (Хламидия трахоматис) .
2. Chlamydia psittaci .
3. Chlamydia pneumonia .
4. Chlamydia pecorum .

• Chlamydia psittaci – вызывает у человека атипичную пневмонию, энцефаломиокардит, артрит, пиелонефрит.
• Chlamydia pecorum описана недавно, изолирована от животных-овец, крупного рогатого скота. Имеет сходство с Chlamydia psittaci . Роль в патогенезе заболеваний человека неизвестна.
• Chlamydia pneumoniae вызывает у взрослых острые респираторные заболевания и мягкую форму пневмонии.
• Вид Chlamydia trachomatis встречается только у человека, в ней выявлены 18 антигенных вариантов (серотипов).
  Серотипы А,В,С -- возбудители трахомы. Переносчиками являются насекомые, основной путь заражения -- попадание инфекционного агента посредством втирания в область слизистой оболочки глаза. Образующиеся в результате развития инфекционного процесса рубцы ведут к потере зрения. Серотипы L1-L3 размножаются в лимфоидной ткани и являются возбудителями тропической венерической болезни Lymphogranuloma venerum. В случае серотипов от D до К -- заражение происходит при половом контакте, значительно реже -- при втирании, новорожденный при родах заражается от инфицированной матери.

Физиология и патогенез

Жизненный цикл хламидий существенно отличается от бактерий.

Хламидии существуют в двух формах, различающихся по морфологическим и биологическим свойствам. Высокоинфекционной, спороподобной, внеклеточной формой является элементарное тельце (ЭТ), и вегетативной, репродуцирующейся, внутриклеточной -ретикулярное тельце (РТ).

ЭТ имеет вид сферы диаметром 0,15-0,2 мкм. РТ имеет структуру типичных грамотрицательных бактерий размером около 1 мкм (См. рис1.). В ЭТ содержится больше дисульфидных связей, что позволяет им противостоять осмотическому давлению.

Первый этап инфекционного процесса -- адсорбция ЭТ на плазмалемме чувствительной клетки хозяина. Важную роль на этом этапе играют электростатические силы. Внедрение хламидий происходит путем эндоцитоза. Инвагинация участка плазмалеммы с адсорбированным ЭТ происходит в цитоплазму с образованием фагоцитарной вакуоли. Эта фаза занимает 7-10 часов. После этого уже в клетке в течение 6-8 часов происходит реорганизация ЭТ в вегетативную форму-ретикулярное тельце, способное к росту и делению. Именно на этой фазе эффективно курсовое применение антибактериальных препаратов, поскольку ЭТ к ним не чувствительно.

Размножение хламидий ведет к формированию включений, известных под названием телец Провачека. В течение 18-24 часов развития они локализованы в цитоплазматическом пузырьке, образованном из мембраны клетки хозяина. Во включении может содержаться от 100 до 500 хламидий. Остановка процесса на этой стадии ведет к персистенции хламидийной инфекции. Далее начинается процесс созревания ретикулярных телец через переходные (промежуточные) тельца в течение 36-42 часа развития в ЭТ следующего поколения. Полный цикл репродукции хламидии равен 48-72 часам и завершается разрушением пораженной клетки, в случае возникновения для хламидии неблагоприятных метаболических условий этот процесс может затягиваться на более длительный период.

Хламидии могут высвобождаться из инфицированной клетки через узкий ободок цитоплазмы. При этом клетка может сохранять жизнеспособность, этим можно объяснить бессимптомность течения хламидийной инфекции.

Защитная реакция на начальной стадии инфекции осуществляется полиморфоядерными лимфоцитами. Существенную роль в защите организма играет поликлональная активация В-лимфоцитов. В сыворотке крови и секреторных жидкостях при хламидиозе обнаруживают значительное количество иммуноглобулинов IgG, IgМ, IgA. Однако ведущую роль в защите от хламидийной инфекции занимают Т-хелперы, активирующие фагоцитарную активность макрофагов.

Ультраструктура

Использование методов ультраструктурного анализа позволило доказать возможность персистирования хламидий в эпителиальных клетках и фибробластах инфицированных слизистых мембран. Хламидии поглощаются периферическими моноцитами и распространяются в организме, моноциты оседают в тканях и превращаются в тканевые макрофаги (в суставах, в сосудах, в области сердца). Тканевые макрофаги могут сохранять жизнеспособность в течение нескольких месяцев, являясь при этом мощным антигенным стимулятором, приводя к образованию фиброзных гранулем в здоровой ткани. Хламидии или их фрагменты могут высвобождаться из клеток и вызывать образование специфических антител, независимо от того, определяется ли хламидийный антиген в месте проникновения инфекции.

Структура клеточной стенки хламидии соответствует общему принципу построения грамотрицательных бактерий (рис. 2). Она состоит из внутренней цитоплазматической и наружной мембран (обе являются двойными, обеспечивая прочность клеточной стенки). Антигенные свойства хламидий определяются внутренней мембраной, которая представлена липополисахаридами. В нее интегрированы так называемые белки наружной мембраны (Outer membrane proteins-OMP). На основной белок наружной мембраны-Major Outer Membrane Protein (MOMP) приходится 60% общего количества белка. Оставшаяся антигеннная структура представлена белками наружной мембраны второго типа -- ОМР-2.

Антигены

Все хламидии имеют общий групповой, родоспецифичный антиген (липополисахаридный комплекс, реактивной половиной которого является 2-кето-3-дезоксиоктановая кислота), используемый при диагностике заболевания иммунофлюоресцентными методами со специфическими антителами.

Белки МОМР и ОМР-2 содержат видо- и серотипоспецифические эпитопы. Однако в них имеются также области с высоким сходством среди видов (родоспецифические эпитопы), что обуславливает возможность появления перекрестных реакций. Основной белок клеточной мембраны и богатые цистеинами другие белки связаны дисульфидными связями. Обнаружено пять генов дисульфид- связанных изомераз, возможно играющих роль в реструктуризации цистеинбогатых белков при дифференциации элементарных телец в ретикулярные. У Сhl. trachomatis выявлено 9 генов, кодирующих поверхностные мембранные белки, у Chlamydia р neumonia –18.

Таблица 1. Антигены хламидий (по Mardh P., 1990)

Генетика

В 1998 году Stephens et. al. сообщили о секвенировании генома Chlamydia trachomatis . Геном хламидии имеет небольшой размер и составляет не более 15% генома кишечной палочки. Он состоит из хромосомы, содержащей 1042519 пар оснований (58,7%) и плазмиды, имеющей в своем составе 7493 пар оснований.

Анализ генома позволил выделить 894 гена, кодирующих различные белки. Сходство с ранее исследованными белками других бактерий позволило определить функциональное назначение 604 (68%) кодируемых белков. 35 (4%) белков были схожи с белками, имеющимися у других бактерий. В оставшихся 255 (28%) белках последовательности были непохожи на ранее изученные. Анализ белковых последовательностей показал, что 256 (29%) хламидийных белков группируются в 58 семейств в пределах генома подобно группированию белков у бактерий с небольшим геномом, таких как микоплазмы и Haemophilus influenzae .

(0,2–1,5 мкм), грамотрицательные, облигатные внутриклеточные паразиты. За неспособность синтезировать собственные высокоэнергетические соединения (они развиваются за счет богатых энергией соединений клетки–хозяина) их называют иногда «энергетическими паразитами». Включают одно семейство , один род с двумя видами– Chlamydia trachomatis – возбудитель трахомы и Ch. psittaci – возбудитель орнитозов.

(Источник: «Микробиология: словарь терминов», Фирсов Н.Н., М: Дрофа, 2006 г.)

Хламидии

(Источник: «Словарь терминов микробиологии»)

Смотреть что такое "хламидии" в других словарях:

Хламидии Chlamydia trachomatis Научная классификация Царство: Бактерии … Википедия

- (Chlamydiales), порядок бактерий. Кокковидные микроорганизмы (диам. 0,2 1,5 мкм) с характерным облигатно внутриклеточным способом размножения. Включают сем. (Chlamydiaсеае) с единств, родом и 2 видами (Chlamydia trachomatis и С. psittaci). X.… … Биологический энциклопедический словарь

- (Chlamydia, Ber; син. миягаванеллы) род микроорганизмов сем. Chlamydiaceae (порядок Chlamydiales), объединяющий неподвижных коккоподобных грамотрицательных внутриклеточных паразитов, окрашивающихся по Романовскому Гимзе; включает виды, вызывающие … Большой медицинский словарь

1. Классификация: надцарство Procaryota, царство Bacteria, раздел Scotobacteria, класс Bacterias, порядок Chlamydiales, c. Chlamydiaceae, р. Chlamydia, в. C. trachomatis (1 биовар – трахома, 2 биовар – венерическая лимфогранулема, 3 биовар – уро – и экстрагенитальные хламидиозы), C. psitacci (орнитоз), C. pneumoniae.

2. Морфология: Гр-, мелкие кокки, бескапсульные, не имеют жгутиков, неподвижны. Представлены в двух формах: элементарные тельца сферической формы (вне человека) и ретикулярные тельца (внутриклеточно).

4. Биологические свойства:

А) на искусственных питательных средах не размножаются

Б) культивируются в желточном мешке куриных эмбрионов и в культурах клеток

5. АГ структура: группоспецифический липогликопротеид, видоспецифический АГ.

6. Факторы патогенности и патогенез:

А) орнитоз:

Адгезия на рецепторах эпителиоцитов бронхов, бронхиол, лимфоцитов → проникновение и размножение в кл → разрушение кл → проникновение в интактные кл → бактериемия → занос в паренхиматозные органы.

Б) трахома и венерическая лимфогранулема, урогенитальный хламидиоз:

При трахоме и урогенитальном хламидиозе: попадание на слизистую мочеполовых органов, прямой кишки, конъюнктиву глаз → размножение и накопление в эпителиальных клетках → выделение токсинов → местные воспалительные процессы (уретрит, конъюнктивит, проктит) → распространение по слизистым → поражение мочеполовых органов.

При венерической лимфогранулеме 1) воспаление в области ворот не выражено 2) распространение МБ лимфогенное 3) поражаются в основном л. у. При этом хламидии и их токсины могут проникать в кровь, обусловливая аллергическую перестройку организма без возникновения вторичных гематогенных очагов в других органах.

7. Клинические проявления:

А) орнитоз: явления общей интоксикации, поражение легких и склонность к затяжному течению с обострениями.

Б) трахома: поражение роговицы и конъюнктивы с образованием фолликулов (трахоматозных зерен), в поздней стадии - рубцеванием конъюнктивы и хряща век

В) венерическая лимфогранулема: поражение преимущественно области наружных половых органов, промежности и прямой кишки

8. Иммунитет: ГИО, КИО, ГЗТ. Постинфекционный иммунитет кратковременный и нестойкий. Наблюдаются случаи повторных заболеваний и реинфицирования.

9. Эпидемиология.

А) орнитоз: источник – птицы. ОПЗ – аэрозольно.

Б) трахома: источник – больные с активными и стертыми формами, с рецидивами заболевания, а также носителям. ОПЗ – через руки, одежду, полотенце и др.

В) венерическая лимфогранулема, урогенитальный хламидиоз: источник – больной человек или носитель, ОПЗ – половой, иногда контактно-бытовой.

10. Профилактика: вакцинопрофилактика не применяется.

11. Лечение: АБ тетрациклиновой группы, эритромицину и рифампицину.

12. Диагностика:

1. Бактериоскопический метод исследования: выявление хламидии, их морфологических структур и антигенов в пораженных клетках (клиническом материале).

Материал для исследования: соскобные препараты с доступных исследованию слизистых оболочек мочеполового тракта (уретра, шейка матки и т. п.) и других органов (конъюнктива, прямая кишка и пр.) при экстрагенитальных формах.

Мазок по Романовскому-Гимзе. Цитоплазматические включения хламидии (тельца Гальберштедтера-Провачека) содержат крупные ретикулярные тельца или мелкие элементарные тельца. По цвету и внутренней структуре РТ и ЭТ отличаются от ядра клетки и цитоплазмы.

Метод характеризуется сравнительно низкой чувствительностью. Применение люминисцирующих поликлональных и моноклональных антител для выявления АГ хламидии в цитоплазматических включениях в соскобных препаратах урогенитального тракта значительно увеличивает чувствительность и специфичность метода. Используется как прямой, так и непрямой иммунофлюоресцентный метод. При люминесцентной микроскопии антигены хламидии выявляют на красном или оранжевом фоне цитоплазмы эпителиальных клеток в виде внутриклеточных включений ярко-зеленого цвета. По информативности и чувствительности уступает только бактериологическому методу.

При диагностике орнитоза и других зоонозных хламидиозов бактериоскопический метод не применяется.

2. Бактериологический метод исследования: выделение хламидии из инфекционного материала заражением куриных эмбрионов, лабораторных животных или клеточных культур с последующей индикацией возбудителя.

Материал для исследования: – тот же, что и при бактериоскопии. При орнитозе – кровь или мокрота. Кровь из вены (не менее 5 мл) исследуют в первые 7-10 дней заболевания, мокроту – до 14 дня заболевания. Для удаления сопутствующей микрофлоры добавляют антибиотики, не действующие на хламидии (стрептомицин, нистатин, гентамицин). При заражении куриного эмбриона исследуемый материал вводят в желточный мешок 6-7-суточногоразвивающегося эмбриона. Индикацию хламидии проводят через 48-72 часа на основании обнаружения типичных цитоплазматических включений, содержащих элементарные и ретикулярные тельца (мазки-отпечатки из желточных мешков куриных эмбрионов и (или) оценка зараженных клеток – окраска по Маккиавелло, прямая и непрямая РИФ).

При диагностике орнитоза кроме культур клеток можно заражать пибораторных животных (в мозг или внутрибрюшинно).

3. Серологический метод исследования: антитела выявляют в сыворотке крови, которую исследуют 2-3 раза с интервалом 10-14 дней, и секретах половых органов. Для диагностики используют РСК, РПГА, РИФ, ИФА. При урогенитальных хламидиозах диагностически значимыми в РИФ являются титры 1:32-1:64. Наиболее достоверным является нарастание титра антител в четыре и более раза.

4. Аллергологический метод исследования: постановка кожно-аллергических проб. Используется при диагностике орнитоза с орнитозным аллергеном. Внутрикожная проба становится положительной с первых дней заболевания у большинства больных, сохраняясь до года и более.